脂质体品牌脂质体(巨噬细胞清除剂)全集
2018年3月,蚂蚁淘正式与氯膦酸盐脂质体代理商签约。
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2018年3月,蚂蚁淘正式与氯膦酸盐脂质体代理商签约。
去除巨噬细胞是研究巨噬细胞功能的重要方法。荷兰阿姆斯特丹Vrije大学Nico van Rooijen教授研发的氯膦酸盐脂质体,可以利用巨噬细胞的内吞机制,将膜不通透的氯磷酸带入细胞内,从而达到清除巨噬细胞的目的。
作用原理:
两亲性磷脂分子在水中可以形成同心圆的球形磷脂双分子层,磷脂双分子层之间被水相隔开。溶解在水溶液中的氯磷酸酯在形成脂质体的过程中被包裹在磷脂双层之间的水相中(如图1所示)。游离的氯磷酸不能自由通过脂质体的脂双层。随着脂质体被巨噬细胞吞噬,在巨噬细胞溶酶体磷酸酶的作用下,溶解在脂质体水相中的氯磷酸可逐渐释放出来,并在细胞内积累。当达到一定浓度时,巨噬细胞会受到不可逆的损伤,从而进入凋亡的过程(图2)。死亡巨噬细胞释放的氯磷酸盐的细胞外半衰期非常短(约15分钟),可通过泌尿系统排泄。
图1:氯磷酸酯-脂质体复合物。在脂质体形成过程中,氯磷酸溶解在水溶液中,包裹在磷脂双层之间的水相中。
图2:巨噬细胞清除原理。涂有氯磷酸酯的脂质体(正方形)通过巨噬细胞的内吞作用进入细胞,与溶酶体(L)融合后,在磷脂酶(箭头)的作用下释放出氯磷酸酯。当细胞内的氯磷酸盐浓度达到一定浓度时,会对巨噬细胞造成不可逆的损伤,从而迫使其凋亡。
产品性质:
1毫升脂质体混悬液中含有约5毫克的氯磷酸酯。所用的磷酸盐缓冲液是10 mM Na2HPO4、10 mM NaH2PO4和140 mM NaCl。
体内脂质体注射:
每隔一天尾静脉注射200l氯膦酸盐脂质体,根据实验要求制定注射方案。用免疫组织化学或流式细胞仪检测巨噬细胞的清除率。
尾静脉注射法:
(1)将老鼠放入倒置的饭盒中,从管口拉出尾巴。老鼠的尾巴上有两条动脉和三条静脉。两条动脉位于尾部背侧和腹侧,三条静脉呈之字形分布,一般采用左右静脉;
(2)将纱布浸泡在70度左右的温水中,取出包裹尾部,使尾部血管扩张,表皮角质软化;
(3)进行尾部静脉注射时,用左手拇指和食指前后按压大鼠尾部,留长约2cm,使皮肤紧张,静脉更饱满。右手持1ml针头注射器,使针头与静脉平行(小于30角)。从尾巴的下半部分插入针头,仔细观察。如果没有反抗,没有出现白色俯仰,说明已经穿透血管。
(4)有些实验需要连续几天反复尾静脉注射。注射部位尽量从尾端开始,依次向尾根移动,改变血管位置进行注射。拔针后,用棉球轻轻按压注射部位1-2分钟止血。
效果:案例1:案例2:
左图为正常脾细胞中阳性巨噬细胞的染色结果。右图为氯磷酸二钠-脂质体注射液2天的观察结果,可以发现只有少量的巨噬细胞残留。左图为正常肝细胞中的库普弗阳性细胞。右图显示了注射氯磷酸二钠-脂质体2天后肝脏中枯否细胞的染色结果,枯否细胞基本被消除。
FAQ:
Q:收到氯膦酸盐脂质体后该怎么办?A:如果在收到氯磷酸脂质体后不能立即使用,应放在4的冰箱中。禁止冷冻储存!使用时作为原液使用,不能稀释。脂质体容易沉淀,建议使用前轻轻混合。另外,4氯磷酸脂质体不能立即使用,需要放回室温后再注射。
Q:氯膦酸盐脂质体能否用于体外巨噬细胞清除?A:产品可用于体外清除巨噬细胞,但这种方法更适合于体内实验。主要是因为在体外培养的过程中,死细胞释放出来的或者脂质体“泄露”出来的氯磷酸会一直存在于培养基中,而在体内,氯磷酸的半衰期很短,很快就会被肾脏清除。虽然游离的氯磷酸不会进入细胞或脂质体,但一旦在培养基中积累,就会慢慢进入细胞。
Q:在静脉注射氯膦酸盐脂质体后,动物很快死亡。原因是什么?A:一方面有可能是动物注射了异种脂质体混悬液。建议使用前轻轻摇匀。脂质体在体外一段时间后会沉淀。如果需要长时间一次注射多个动物,那么脂质体就会在注射器中沉淀,形成不均匀的混悬液。因此,第一次喷射的测量值和最后一次喷射的测量值会发生明显的变化。另一方面,有可能是脂质体刚从冰箱里拿出来还没有回到室温。
Q:动物注射氯膦酸盐脂质体几天后死亡?答:这可能是被细菌污染了,清除体内的巨噬细胞会增加感染的机会,比如病毒颗粒、细菌或酵母菌。
用Q:静脉注射氯膦酸盐脂质体后,大鼠脾/肝中的ED1细胞没有完全消失?答:大鼠成熟巨噬细胞ED1和ED2均阳性,但一些不吞噬或吞噬很少的前体细胞也是ED1,但它们是ED2-。因此,ED2的所有细胞都可以被完全消除,但ED1的细胞只能被部分消除,消除比例取决于前体细胞与成熟巨噬细胞的比例。
Q:氯膦酸盐脂质体没有达到预期效果?答:大量生产氯磷酸脂质体。每批都会检测氯磷酸的浓度和一些可能的污染物,无误后才卖给客户。此外,脂质体易受极端温度的影响。正确的运输和储存方式是4~8,悬浮液既不能冷冻,也不能加热超过30。需要在收到货后3个月内用完,否则可能会影响使用效果。
Q:静脉注射时,可以增加注射量吗?答:静脉注射应以动物体重为准,不能超过,但腹腔注射可适当增加注射量。皮下注射需要根据注射部位的体积来决定。回到企业https://www.zhucesz.com/看到更多。